在細胞培養中，你是否遇到過【細胞狀態突然下滑，原因不明】 、【實驗結果無法重復，數據波動巨大】、【細胞增殖緩慢，傳代周期延長】、【細胞功能實驗出現異常結果】。這些困擾可能正源于一個隱形威脅：內毒素污染。
在細胞培養的精密世界里，一個微小的污染就足以拖慢整個實驗進程。其中，革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的脂多糖（LPS）成分，在細菌死亡或細胞壁破裂后便會釋放出來，成為細胞培養中不容忽視的“隱形刺客"。
內毒素的"罪狀"
內毒素，本質為磷脂多糖-蛋白質復合物，其毒性成分主要為類脂質A。這種微小的分子，雖然肉眼不可見，卻能對細胞產生巨大的影響。
在細胞培養過程中，內毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加，甚至影響瞬時轉染的效率。更具體地說，內毒素會激活細胞的免疫反應，導致炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）等的釋放。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能，導致細胞內信號通路的紊亂，甚至可能引發細胞凋亡。當細胞處于免疫激活狀態時，它們可能會減緩生長，因為需要將資源用于炎癥反應而非分裂增殖。此外，內毒素可能干擾細胞的代謝途徑，影響蛋白質合成、DNA合成等關鍵過程。
對于進行細胞功能研究（如細胞因子分泌、藥物敏感性評估或誘導分化）的科研人員來說，內毒素的影響更為隱蔽：它可能導致細胞異常分泌IL-6、TNF-α等炎癥因子，造成ELISA檢測出現“假陽性"。
此外，內毒素的“起效劑量"極低——只要培養液中內毒素含量超過0.1 EU/mL，即可顯著激活免疫細胞，引發強烈的免疫反應。
內毒素污染的來源與檢測
內毒素污染時有發生且不易察覺，血清、培養液、緩沖液及配制用水等都可能是污染源。
目前，內毒素的檢測采用鱟試劑法（LAL），包括凝膠法及光度測定法兩大類。
近年來，也出現了電化學適配體傳感器等新興檢測技術，靈敏度較傳統方法有顯著提高。
但預防始終勝于治療，嚴格控制實驗試劑和操作環境中的內毒素水平，才是保障細胞培養成功的根本之道。
HEPES的選擇與質量控制
在細胞培養體系中，緩沖液的選擇對于控制內毒素污染至關重要。HEPES作為一種常用的生物緩沖劑，其內毒素水平直接影響細胞培養結果。
在原代細胞培養、干細胞研究和細胞治療等對質量要求非常高的應用中，可以選擇符合注射劑級別標準的 HEPES 產品。這類產品通常經過更嚴格的質量控制，包括內毒素檢測等關鍵指標，能夠更好地滿足細胞培養的質量要求。
AVT 的 HEPES 作為通過國家藥品監督管理局關聯審評的注射級 A 狀態產品，代表著其質量達到了高標準、嚴要求。該產品內毒素含量嚴格控制在＜0.01 EU/mg，遠優于常規細胞培養中 0.1 EU/mL 的控制要求。對于從事原代細胞培養、干細胞研究以及細胞治療相關實驗的科研人員而言，選擇這款超低內毒素 HEPES 不僅能確保實驗結果的可靠性，更是推動科研成果向臨床轉化的重要保障。
隨著細胞治療領域的快速發展，對試劑質量的要求也將不斷提高。嚴格控制內毒素水平，既是保障實驗數據可靠性的基礎，也是推動科研成果向臨床轉化的重要保障。
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